Microscop Light-Sheet Bruker TruLive3D Imager

Microscopia light-sheet, cunoscută și sub denumirea de Light-Sheet Fluorescence Microscopy (LSFM) sau Single Plane Illumination Microscopy (SPIM), este o tehnică de microscopie de fluorescență utilizată pentru imagistica rapidă a probelor biologice tridimensionale.

Spre deosebire de metodele în care întreaga probă este expusă repetat la lumina de excitație, în microscopia light-sheet este iluminat selectiv planul observat. Această abordare permite achiziția rapidă a imaginilor 3D și reduce expunerea probelor biologice la lumină.

Din acest motiv, microscopia light-sheet este deosebit de utilă pentru studiul probelor vii și sensibile, inclusiv organoide, sferoide, culturi celulare 3D, embrioni și alte modele biologice tridimensionale.

Bruker Luxendo TruLive3D Imager este un microscop inversat de fluorescență cu foaie de lumină, optimizat pentru imagistica 3D rapidă și pe termen lung a probelor vii delicate, în mediul lor biologic nativ. Iluminarea bilaterală și detecția de jos, printr-un singur obiectiv, permit achiziția rapidă, imagistica în profunzime și iluminarea uniformă, cu efecte minime de umbrire. În același timp, sistemul avansat de control al condițiilor de mediu contribuie la menținerea viabilității probelor în experimente cu durate de la câteva ore până la mai multe zile.

Un suport multiplex de mari dimensiuni poate găzdui sute de organoide, sferoizi, culturi celulare 3D sau embrioni de mici dimensiuni și permite compararea a până la șase condiții experimentale în cadrul aceluiași experiment.

Caracteristici și beneficii

• Imagistică 3D rapidă, cu fototoxicitate redusă, a probelor vii delicate
• Iluminare bilaterală pentru imagistică profundă și uniformă, cu efecte reduse de umbrire
• Detecție cu apertură numerică mare pentru sensibilitate și rezoluție spațială excelente
• Imagistică pe termen lung în condiții fiziologice controlate
• Achiziție multiplexată pentru sute de probe și până la șase condiții experimentale
• Tehnologii dual-destriping și lentilă TAG — lentilă cu gradient acustic reglabil — pentru o uniformitate îmbunătățită a foii de lumină
• Acces facil la probe prin partea superioară și suporturi TruLive3D flexibile
• Modul opțional de fotomanipulare pentru experimente avansate de imagistică funcțională
• Software LuxBundle integrat pentru achiziție, procesare și vizualizare 3D

Aceste caracteristici sunt concepute în special pentru fluxuri de imagistică live cu multiple probe și condiții experimentale, utilizând organoide, sferoizi, culturi celulare și embrioni de mici dimensiuni.

Specificații tehnice

• Modalitate de imagistică: Microscopie inversată de fluorescență cu foaie de lumină, cu iluminare bilaterală și detecție printr-un singur obiectiv
• Generarea foii de lumină: Foi de lumină gaussiene generate prin scanarea fasciculului
• Grosimea foii de lumină: Reglabilă între 2 și 6 µm
• Optică de iluminare: Corectată cromatic în intervalul 440–660 nm
• Obiective de iluminare: 2 × obiective Nikon CFI Plan Fluor 10× W, 0,3 NA, cu imersie în apă
• Obiectiv de detecție: Nikon CFI Apo 25× W, 1,1 NA, cu imersie în apă
• Configurație alternativă a obiectivului: Olympus XLUMPLFLN 16×, 0,8 NA
• Mărire efectivă: Mai multe opțiuni, în funcție de configurație, de la aproximativ 8× până la 62,5×
• Detecție: 2 × camere sCMOS de mare viteză Hamamatsu ORCA-Flash4.0 V3
• Rezoluția camerei: 2048 × 2048 pixeli, cu dimensiunea pixelului de 6,5 × 6,5 µm
• Viteza de achiziție: Peste 80 de cadre pe secundă la cadru complet și până la 500 de cadre pe secundă prin decuparea unei subregiuni a senzorului
• Eficiență cuantică maximă: Până la 82% la 560 nm
• Detecție spectrală: Două canale de detecție, cu roți de filtre de emisie de mare viteză, cu câte 10 poziții
• Imagistică simultană: Trei poziții dicroice motorizate pentru achiziție simultană pe două canale
• Controlul iluminării: Filtre motorizate cu densitate neutră, cu transmisii de 90%, 10% și 1%
• Controlul condițiilor de mediu: Temperatură între 20 și 37 °C, control al concentrației de CO₂, O₂/N₂ și al umidității
• Capacitatea suportului pentru probe: Suport de 75 mm, capabil să găzduiască până la câteva sute de probe
• Condiții experimentale: Până la șase condiții distincte, utilizând trei vase TruLive3D cu câte două compartimente
• Montarea probelor: Suporturi pe bază de folie FEP pentru celule, organoide, sferoizi și embrioni
• Cursa platinei: 66 × 3 × 3 mm
• Reducerea artefactelor: Tehnologie dual-destriping prin scanare pivotantă
• Optimizarea foii de lumină: Tehnologie cu lentilă TAG pentru scanare axială rapidă și uniformizarea iluminării
• Fotomanipulare: Modul opțional de fotomanipulare
• Software: Bruker LuxBundle pentru achiziție, controlul experimentelor multidimensionale, postprocesare și vizualizare 3D
• Designul sistemului: Configurație compactă și fără vibrații, de tip benchtop, care nu necesită o masă optică pneumatică

Valorile publicate de Bruker pentru obiective, mărire și câmp vizual depind de configurația optică selectată. Prin urmare, configurația finală trebuie confirmată la pregătirea unei oferte comerciale sau a unei fișe tehnice oficiale.

Producător

Bruker

Aplicații

Imagistică live-cell, Imagistică time-lapse pe termen lung, Imagistica culturilor celulare 3D, Imagistica organoidelor, Imagistica sferoizilor, Imagistică de mare capacitate pentru multiple probe, Studii farmacologice în condiții experimentale multiple, Biologia dezvoltării, Dezvoltarea embrionară, Imagistică in vivo a organismelor model de mici dimensiuni, Cercetare pe zebrafish, Cercetare pe Drosophila, Imagistica embrionilor de șoarece, Biologia cancerului, Tumorigeneză, Studii privind răspunsul la medicamente, Toxicologie, Cercetarea celulelor stem, Imagistica celulelor primare, Studii ale interacțiunilor celulă–celulă, Imunologie, Studii privind vindecarea rănilor, Fotomanipulare.

FAQ

Ce este un microscop light-sheet?

Un microscop light-sheet este un microscop de fluorescență care iluminează selectiv un plan subțire al probei. Tehnica este cunoscută ca Light-Sheet Fluorescence Microscopy (LSFM) sau Single Plane Illumination Microscopy (SPIM) și permite imagistică 3D rapidă a probelor biologice.

Pentru ce este utilizat Bruker TruLive3D Imager?

Bruker TruLive3D este conceput pentru imagistica 3D rapidă și de lungă durată a probelor biologice vii. Printre aplicațiile principale se numără imagistica organoidelor, sferoidelor, culturilor celulare 3D și embrionilor, precum și experimentele live-cell și time-lapse.

TruLive3D poate fi utilizat pentru imagistica organoidelor?

Da. TruLive3D este optimizat pentru imagistica 3D a organoidelor și a altor culturi celulare tridimensionale. Sistemul permite realizarea experimentelor volumetrice și time-lapse cu mai multe probe și condiții experimentale.

Care este avantajul microscopiei light-sheet pentru live-cell imaging?

În microscopia light-sheet, lumina de excitație este concentrată în principal asupra planului observat. Astfel, expunerea totală a probei poate fi redusă, ceea ce este avantajos pentru imagistica repetată și experimentele live-cell desfășurate pe perioade extinse.

Ce înseamnă iluminare light-sheet bilaterală?

TruLive3D iluminează proba din două direcții. Această configurație contribuie la obținerea unei iluminări mai uniforme și la reducerea zonelor de umbrire care pot apărea în probele tridimensionale.

Este TruLive3D potrivit pentru experimente time-lapse?

Da. Sistemul este conceput pentru imagistica rapidă și de lungă durată a probelor biologice vii și poate fi utilizat pentru experimente time-lapse 3D în condiții de mediu controlate.

Care este diferența dintre microscopia light-sheet și microscopia confocală?

Microscopia confocală și microscopia light-sheet utilizează metode diferite de iluminare și detecție. Light-sheet este deosebit de potrivită pentru imagistica rapidă a volumelor 3D și pentru experimente îndelungate cu probe vii, în timp ce microscopia confocală este utilizată într-o gamă foarte largă de aplicații de imagistică celulară și subcelulară.

Cum pot configura un sistem TruLive3D pentru aplicația mea?

Configurația optimă depinde de tipul probelor, fluoroforii utilizați, rezoluția necesară, durata experimentelor și numărul de probe analizate. Echipa APEL Laser poate oferi consultanță pentru alegerea configurației TruLive3D potrivite aplicației și poate furniza informații tehnice și comerciale pentru România.