BC43 Series – Microscop Confocal Ultimate Benchtop | Andor

Designul complet închis și etanș la lumină permite instalarea BC43 pe o masă obișnuită de laborator, fără amenajarea unei camere întunecate. Mecanismul integrat de reducere a vibrațiilor și automatizarea componentelor optice facilitează obținerea unor rezultate reproductibile chiar și de către utilizatori cu experiență limitată în microscopie avansată.

BC43 poate fi utilizat pentru celule fixe sau vii, culturi 3D, organoizi, embrioni, organisme model, secțiuni de țesut și probe biologice de dimensiuni mari. Configurațiile confocale utilizează tehnologie spinning disk derivată din platforma Andor Dragonfly, pentru achiziții rapide și secționare optică eficientă.

Platforma este disponibilă în mai multe configurații:

• BC43 WF pentru fluorescență widefield și lumină transmisă;
• BC43 CF pentru widefield, confocal spinning disk și lumină transmisă;
• BC43 SR cu modul suplimentar de super-rezoluție;
• upgrade în teren de la widefield la confocal și de la configurațiile standard la super-rezoluție.

APEL Laser vă poate sprijini în alegerea configurației BC43, obiectivelor, modalităților de imagistică, modulelor software și soluțiilor de analiză necesare aplicației.

Avantajele sistemului Andor BC43

Microscopie confocală rapidă

BC43 CF utilizează un sistem confocal spinning disk cu matrice de microlentile și pinhole-uri. Mai multe puncte ale probei sunt iluminate și detectate simultan, spre deosebire de microscoapele confocale care scanează secvențial un singur punct.

Această arhitectură permite:

• achiziția rapidă a imaginilor confocale;
• realizarea eficientă a stack-urilor Z;
• imagistica proceselor biologice dinamice;
• reducerea timpului total de expunere;
• productivitate ridicată pentru probe și volume mari;
• imagistică mai blândă pentru celule și organisme vii.

Andor indică o productivitate de cel puțin zece ori mai mare decât cea a unor sisteme confocale bazate pe scanare punct-cu-punct, în funcție de experiment și configurație.

Imagistică live-cell cu fototoxicitate redusă

Iluminarea paralelă, colectarea eficientă a semnalului și camera sCMOS sensibilă reduc timpul necesar pentru fiecare achiziție.

BC43 poate fi utilizat pentru monitorizarea pe termen lung a:

• diviziunii celulare;
• migrației;
• dezvoltării embrionare;
• transportului intracelular;
• dinamicii organitelor;
• semnalizării celulare;
• interacțiunilor dintre celule;
• proceselor din organisme model.

Sistemul este proiectat pentru a permite imagistica probelor vii pe perioade lungi, reducând riscul de fotodecolorare și perturbare indusă de iluminare.

Sistem complet închis

Capacul etanș la lumină permite utilizarea microscopului fără o cameră întunecată.

Designul închis oferă mai multe beneficii:

• eliminarea influenței luminii ambientale;
• condiții de achiziție mai consistente;
• protejarea probei și a componentelor optice;
• reducerea contaminării;
• operare simplificată în laboratoare comune;
• instalare într-un spațiu redus.

Operare simplificată

BC43 a fost proiectat pentru utilizatori cu niveluri diferite de experiență. Automatizarea focalizării, selectării obiectivului, iluminării, filtrelor, mesei XY și achiziției reduce numărul reglajelor manuale.

Andor indică un interval tipic de aproximativ 30 de minute până la două ore pentru ca un utilizator nou să poată începe să lucreze independent, în funcție de complexitatea experimentului și instruirea oferită.

Configurațiile BC43

BC43 WF – microscop widefield extensibil

BC43 WF este destinat laboratoarelor care efectuează predominant imagistică fluorescentă pe probe subțiri sau cu semnal redus.

Configurația poate include:

• fluorescență widefield cu laser;
• brightfield;
• Differential Phase Contrast;
• deconvoluție GPU ClearView™;
• achiziție multicanal;
• stack-uri Z;
• time-lapse;
• montaj și imagistică multipunct;
• analiză în Imaris.

BC43 WF poate fi actualizat ulterior în teren la configurația confocală, fără înlocuirea întregului instrument.

BC43 CF – microscop confocal spinning disk

BC43 CF adaugă modul confocal spinning disk pentru secționare optică și imagistică tridimensională a probelor mai groase.

Este recomandat pentru:

• organoizi;
• sferoizi;
• embrioni;
• secțiuni de țesut;
• modele 3D;
• neuroștiințe;
• biologia dezvoltării;
• imagistica organismelor model;
• probe pentru care eliminarea luminii nefocalizate este esențială.

BC43 CF păstrează și modalitățile widefield și lumină transmisă, astfel încât utilizatorul poate alege metoda potrivită fiecărui experiment.

BC43 SR – super-rezoluție accesibilă

Modul BC43 SR utilizează tehnologia SRRF-Stream+ optimizată de Andor pentru obținerea unei rezoluții sub limita convențională de difracție.

Producătorul indică:

• rezoluție de până la aproximativ 140 nm;
• îmbunătățire de aproximativ 1,5–1,7 ori față de imagistica convențională;
• compatibilitate cu protocoale standard de marcare;
• utilizare pe probe subțiri sau groase;
• compatibilitate cu modurile widefield și confocal;
• posibilitatea utilizării în experimente live-cell.

Super-rezoluția poate fi utilizată pentru vizualizarea mai clară a filamentelor de actină, microtubulilor, veziculelor, lizozomilor și interacțiunilor dintre proteine.

Compararea configurațiilor

Configurația exactă trebuie verificată în funcție de modelul selectat, opțiunile software și modulele instalate.

Modalități de imagistică

Microscopie confocală spinning disk

Modul confocal elimină o mare parte din lumina nefocalizată și permite separarea optică a diferitelor planuri din probă.

Este potrivit pentru:

• achiziții 3D;
• probe multicelulare;
• culturi tridimensionale;
• țesuturi;
• embrioni;
• organisme model;
• analiza distribuției proteinelor în profunzime.

Fluorescență widefield

Widefield oferă sensibilitate ridicată și viteză maximă pentru probe relativ subțiri.

Poate fi utilizat pentru:

• culturi celulare 2D;
• experimente cu semnal fluorescent slab;
• procese rapide;
• screening;
• time-lapse;
• monitorizarea celulelor vii;
• achiziții unde secționarea confocală nu este necesară.

Brightfield

Brightfield permite observarea probelor cu contrast natural, fără marcaj fluorescent.

Este util pentru:

• organisme model;
• morfologia generală a probelor;
• poziționarea și orientarea probei;
• vizualizarea limitelor țesuturilor;
• corelarea imaginilor structurale cu fluorescența.

Differential Phase Contrast

DPC îmbunătățește vizibilitatea probelor transparente și slab contrastante.

Această modalitate este potrivită pentru:

• celule nemarcate;
• probe transparente;
• verificarea culturilor celulare;
• monitorizarea morfologiei;
• corelarea structurii cu semnalele fluorescente.

Super-rezoluție SRRF-Stream+

SRRF-Stream+ combină mai multe cadre și analizează fluctuațiile locale ale intensității pentru a reconstrui detalii care nu pot fi separate în imagistica convențională.

Comparativ cu tehnicile SMLM, metoda poate fi utilizată cu protocoale de marcare mai apropiate de cele standard și cu fluxuri experimentale mai simple.

Surse de excitație și canale spectrale

BC43 utilizează patru linii laser pentru imagistica fluorescentă:

• 405 nm;
• 488 nm;
• 561 nm;
• 640 nm.

Acestea acoperă numeroși fluorofori utilizați în mod curent, inclusiv coloranți nucleari, proteine fluorescente verzi și roșii și fluorofori din domeniul roșu îndepărtat.

Configurația poate oferi până la zece canale de imagistică:

• patru canale widefield;
• patru canale confocale;
• două modalități de lumină transmisă.

Selecția fluoroforilor trebuie evaluată în raport cu lungimile de undă de excitație, filtrele de emisie și gradul de separare spectrală necesar.

Obiective și focalizare

BC43 poate fi configurat cu până la cinci obiective interschimbabile.

Alegerea obiectivelor trebuie făcută în funcție de:

• dimensiunea probei;
• câmpul de vedere;
• rezoluția necesară;
• grosimea probei;
• distanța de lucru;
• mediul de imersie;
• luminozitatea semnalului;
• tipul plăcii, lamei sau recipientului folosit.

Sunt potrivite atât obiective pentru câmpuri extinse și organisme întregi, cât și obiective cu apertură numerică ridicată pentru structuri subcelulare.

Masa motorizată XYZ permite:

• achiziții multipunct;
• stack-uri Z;
• montarea mai multor câmpuri;
• navigarea automată pe probă;
• achiziții repetate în aceleași poziții;
• scanarea plăcilor multiwell.

Imagistica probelor mari

BC43 poate realiza montajul mai multor câmpuri și volume pentru vizualizarea probelor care depășesc câmpul unui singur obiectiv.

Funcțiile disponibile în Fusion Benchtop includ:

• montage XY;
• stitching XYZ;
• spiral montage;
• irregular montage;
• Focus Map;
• corecția variației intensității pe axa Z;
• achiziții multipunct;
• time-lapse 3D.

Irregular Montage permite achiziția numai a regiunilor relevante, reducând timpul de măsurare și volumul de date.

Focus Map poate compensa înclinarea sau variațiile de înălțime ale probei, menținând zonele selectate în domeniul de focalizare.

Aplicații

Biologie celulară

BC43 poate fi utilizat pentru:

• diviziune celulară;
• citoschelet;
• mitocondrii;
• vezicule și lizozomi;
• transport intracelular;
• migrare;
• adeziune;
• autofagie;
• localizarea proteinelor;
• studii live-cell.

Biologia dezvoltării

Viteza sistemului și capacitatea de a achiziționa volume mari îl fac potrivit pentru:

• embrioni;
• Drosophila;
• pești zebră;
• dezvoltarea organelor;
• morfogeneză;
• diviziuni celulare timpurii;
• urmărirea liniilor celulare;
• experimente 3D time-lapse.

Neuroștiințe

Aplicațiile pot include:

• neuroni și celule gliale;
• prelungiri neuronale;
• spine dendritice;
• sinapse;
• transport axonal;
• rețele neuronale;
• secțiuni cerebrale;
• probe neuronale tridimensionale.

Modulele Imaris disponibile pot fi utilizate pentru trasarea filamentelor, identificarea spinelor și analiza morfologiei neuronale.

Cercetarea cancerului

BC43 poate susține analiza:

• proliferării;
• instabilității genomice;
• migrației și invaziei;
• răspunsului la tratament;
• culturilor tumorale 3D;
• organoizilor;
• distribuției biomarkerilor;
• morfologiei celulare și nucleare.

Organoizi și culturi 3D

Modul confocal permite separarea planurilor optice din probe mai groase decât culturile celulare convenționale.

BC43 poate fi utilizat pentru:

• organoizi intestinali;
• organoizi cerebrali;
• modele tumorale;
• sferoizi;
• culturi pe hidrogel;
• modele tisulare;
• analiza volumetrică și morfologică.

Imunologie și microbiologie

Sistemul poate fi configurat pentru:

• interacțiuni celulă-celulă;
• sinapse imunologice;
• fagocitoză;
• localizarea microorganismelor;
• biofilme;
• răspuns inflamator;
• analiza populațiilor celulare;
• colocalizare multicanal.

Core facilities

Designul simplificat și programul IQ/OQ fac BC43 potrivit pentru facilități comune în care instrumentul este utilizat de cercetători cu niveluri diferite de experiență.

Beneficiile includ:

• instruire rapidă;
• protocoale standardizate;
• reproducibilitate între utilizatori;
• utilizare eficientă a instrumentului;
• rapoarte privind performanța sistemului;
• upgrade-uri ulterioare.

Software Fusion Benchtop

Fusion Benchtop controlează instrumentul și permite configurarea protocoalelor de achiziție multidimensională.

Funcțiile pot include:

• selectarea modalității de imagistică;
• controlul laserelor și canalelor;
• selectarea obiectivului;
• controlul mesei XYZ;
• autofocus;
• achiziții multicanal;
• stack-uri Z;
• time-lapse;
• multipoint;
• montage;
• stitching 3D;
• deconvoluție în timpul protocolului;
• vizualizare 3D în timp real;
• Focus Map;
• Irregular Montage;
• corecția intensității pe adâncime.

Deconvoluția ClearView™ poate fi activată direct în protocol, reducând necesitatea procesării manuale după achiziție.

Analiză de imagini cu Imaris

Sistemele Andor Benchtop sunt furnizate cu pachetul Imaris Quant pentru vizualizare și analiză.

Imaris poate fi utilizat pentru:

• vizualizare 2D, 3D și 4D;
• segmentarea obiectelor;
• identificarea structurilor prin intensitate sau metode bazate pe inteligență artificială;
• numărarea obiectelor;
• măsurarea volumului și morfologiei;
• cuantificarea intensității;
• generarea imaginilor și animațiilor;
• compararea experimentelor;
• analiza suprafețelor și structurilor biologice.

Sunt disponibile module suplimentare pentru tracking, analiza motilității, numărarea celulelor, analiza organitelor și trasarea neuronilor.

Calitate și reproductibilitate IQ/OQ

Andor oferă un program opțional de Installation Qualification și Operational Qualification pentru BC43.

Programul poate verifica parametri precum:

• puterea laserelor;
• uniformitatea iluminării;
• centrajul iluminării;
• coregistrarea canalelor;
• răspunsul detectorului;
• precizia reconstrucției 3D;
• repetabilitatea mesei XY;
• rezoluția laterală și axială;
• nivelul vibrațiilor;
• contaminarea și fondul optic.

Pentru o configurație BC43 evaluată cu un obiectiv 60×, NA 1,42, Andor publică în cadrul programului OQ specificații de până la 280 nm pentru rezoluția laterală confocală medie și până la 725 nm pentru rezoluția axială medie.

Testarea periodică oferă laboratoarelor date cantitative privind performanța instrumentului și poate ajuta la demonstrarea reproductibilității experimentelor între utilizatori, perioade de timp și locații.

De ce să alegeți Andor BC43?

BC43 este potrivit pentru laboratoarele care doresc performanța unui sistem automatizat de imagistică, într-o platformă compactă și simplă.

Principalele beneficii sunt:

• confocal spinning disk rapid;
• widefield și lumină transmisă în același sistem;
• super-rezoluție opțională;
• imagistică 2D, 3D și 4D;
• utilizare pentru probe fixe și vii;
• fototoxicitate redusă;
• design complet închis;
• nu necesită cameră întunecată;
• mecanism integrat pentru reducerea vibrațiilor;
• patru linii laser;
• până la cinci obiective;
• masă XYZ motorizată;
• achiziție multipunct și montage;
• deconvoluție GPU;
• software Fusion Benchtop;
• analiză în Imaris;
• program opțional IQ/OQ;
• upgrade în teren de la widefield la confocal și super-rezoluție.

Configurare și suport prin APEL Laser

APEL Laser vă poate ajuta să definiți o configurație BC43 adaptată aplicației.

Procesul de configurare poate include:

• selectarea BC43 WF, CF sau SR;
• definirea modalităților de imagistică;
• alegerea obiectivelor;
• evaluarea fluoroforilor;
• stabilirea câmpului de vedere și rezoluției;
• configurarea pentru probe vii;
• selectarea suporturilor pentru lame, plăci sau recipiente;
• configurarea experimentelor multipunct;
• alegerea modulelor Fusion;
• alegerea pachetelor Imaris;
• instalare și calibrare;
• instruirea utilizatorilor;
• dezvoltarea protocoalelor;
• mentenanță și suport tehnic.

Întrebări frecvente

Ce este Andor BC43?

BC43 este un sistem compact și automatizat de microscopie fluorescentă, disponibil în configurații widefield, confocal spinning disk și super-rezoluție.

Care este diferența dintre BC43 WF și BC43 CF?

BC43 WF este orientat către imagistica widefield a probelor subțiri și sensibile. BC43 CF include în plus modul confocal spinning disk pentru secționarea optică și imagistica probelor mai groase.

Poate fi actualizat un BC43 WF la confocal?

Da. Andor oferă posibilitatea upgrade-ului în teren de la BC43 WF la BC43 CF.

Poate realiza super-rezoluție?

Da. Modulul SRRF-Stream+ poate furniza o rezoluție de până la aproximativ 140 nm, în funcție de probă, fluorofor, obiectiv și condițiile de achiziție.

Este potrivit pentru celule vii?

Da. Achiziția rapidă și colectarea eficientă a luminii permit imagistica probelor vii cu o doză redusă de iluminare.

Poate măsura organoizi și țesuturi?

BC43 CF este potrivit pentru probe tridimensionale, organoizi, embrioni și secțiuni de țesut. Adâncimea accesibilă depinde de probă, marcaj, obiectiv și proprietățile optice ale țesutului.

Este necesară o cameră întunecată?

Nu. BC43 are un capac etanș la lumină și poate fi instalat pe o masă obișnuită de laborator.

Ce lasere sunt incluse?

Configurația standard utilizează patru linii de excitație: 405, 488, 561 și 640 nm.

Poate realiza achiziții multipunct și montage?

Da. Masa XYZ motorizată și software-ul Fusion permit multipoint, montage, stitching, Focus Map și achiziții multidimensionale.

Este inclus software-ul de analiză?

Sistemele Andor Benchtop includ Imaris Quant, iar module suplimentare pot fi selectate în funcție de aplicație.